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文昌雞原產(chǎn)于海南省文昌市，歷史悠久，富有盛名，是海南省唯一的國家級地方保護品種。文昌雞飼養(yǎng)一般是在坡養(yǎng)100 d 左右，再經(jīng)60 d 的遮光籠養(yǎng)育肥。傳統(tǒng)的文昌雞育肥期飼料主要以熟料為主，飼料加工時需“燒煮”，大量消耗能源并污染環(huán)境。因此，研究一種環(huán)保型發(fā)酵飼料替代傳統(tǒng)的育肥雞飼料意義重大。發(fā)酵飼料是指在人為可控制的情況下，以動植物性農(nóng)副產(chǎn)品、工業(yè)廢棄物為主要原料，接種發(fā)酵微生物，通過微生物的增殖生長，提高飼料的營養(yǎng)成分含量。此外經(jīng)過微生物發(fā)酵的飼料能產(chǎn)生大量有益菌，可維持腸道健康，減少腸道大腸桿菌、沙門氏桿菌和金黃色葡萄球菌等有害菌群對動物的損害，同時降低雞排泄物中的有毒物質(zhì)。本試驗以酵母菌、芽孢桿菌和乳酸桿菌為發(fā)酵菌種，以文昌雞育肥期混合飼料為底物，通過適合微生物發(fā)酵的最佳工藝制作發(fā)酵飼料，并通過飼養(yǎng)試驗測定并比較飼喂不同飼料的文昌雞的生產(chǎn)性能和肉品質(zhì)，探討飼喂混合發(fā)酵飼料對文昌雞生產(chǎn)性能和肉品質(zhì)的影響。

1  材  料

1.1 試驗動物

105 日齡健康、體重接近、體況良好的育肥期文昌雞( 母) 600 只，海南省文昌市文昌雞養(yǎng)殖基地提供。

1. 2 藥品

釀酒酵母菌( Saccharomyces cerevisiae Hansen) 、植物源性乳酸菌(Lactobacillus plantarum) 、蠟樣芽孢桿菌( Bacillus cereus．Frankland) ，由海南熱帶作物研究院生物研究所提供。

1. 3 主要試劑

 MＲS 肉湯( 批號為HB0384－1) 、LB 肉湯( 批號為HB0128) 、YPD 液體培養(yǎng)基( 批號為HB5193－1) ，均購自青島高科園海博生物技術(shù)有限公司。

1. 4 主要儀器

粉碎機( 型號為CF－500 K) ，購自杭州旭眾機械設(shè)備有限公司; 恒溫水浴振蕩器( 型號為DHZ－Q) ，購自常州邁科樂儀器有限公司; 紫外分光光度計( 型號為752 型) ，購自上海光學儀器五廠有限公司; 凱式定氮儀( 型號為SKD－100) ，購自上海沛歐儀器分析有限公司; 脂肪提取儀( 型號為SOX406) ，購自濟南海能儀器有限公司; 馬弗爐( 型號為TNX1200 －20) ，購自上海向北實物有限公司。試劑盒購于上海科華生物工程股份有限公司( 編號分別為20130922和20131012) ; pH 計( 型號為PHBJ－260) ，購于雷磁股份有限公司。

2   方  法

2. 1 試驗設(shè)計及方法

選擇105 日齡健康、體重接近、同一批次的600 只文昌雞( 母) 隨機分成對照組和試驗組，每組300 只，對照組飼喂未發(fā)酵混合飼料，試驗組飼喂混合發(fā)酵飼料。每只雞每天平均喂料量為110 g( 以干料計) ，分2 次飼喂，自由采食，自由飲水。根據(jù)配方采購飼料原料，經(jīng)粉碎、稱重、混勻配制文昌雞育肥期混合飼料，日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

2. 2  發(fā)酵飼料的發(fā)酵工藝條件

經(jīng)發(fā)酵飼料菌種篩選與發(fā)酵工藝優(yōu)化試驗得出:1) 文昌雞育肥期飼料發(fā)酵最佳工藝，發(fā)酵溫度25 ～30 ℃，發(fā)酵時間5 d，飼料含水量45%。2) 菌種及配比，釀酒酵母菌0. 6×108 cfu /kg、蠟樣芽孢桿菌4 ×1011 cfu /kg、植物源性乳酸桿菌1. 35×108 cfu /kg。

2. 3  發(fā)酵混合飼料的制作

2. 3. 1  菌種種子液的制備

將釀酒酵母菌、植物源性乳酸菌、蠟樣芽孢桿菌三種菌株分別在斜面培養(yǎng)基進行2 次轉(zhuǎn)接活化，然后接入液體培養(yǎng)基擴增，成為種子液。

2. 3. 2  飼料的活化菌液的發(fā)酵

將釀酒酵母菌、蠟樣芽孢桿菌、植物源性乳酸菌按照篩選所獲得的最佳配比( 釀酒酵母菌0. 6×108 cfu /kg+蠟樣芽孢桿菌4×1011 cfu /kg+植物源性乳酸桿菌1. 35×108 cfu /kg) 配制2 000 mL，再加入0. 45 kg 紅糖和17 L 水，活化2 h后使用。

2. 3. 3 發(fā)酵飼料的制作

將0. 68 kg 活化菌液加進16～18 L 水中攪勻，然后加入40 kg 飼料中攪拌均勻( 含水量40%～50%) 。用40kg塑料桶裝桶發(fā)酵，將飼料壓實，留10 cm 左右的空間，加蓋時不要擰緊。飼料發(fā)酵3d 后攪拌一次，將蓋擰緊，3 ～ 4 d 后即可發(fā)酵完成。

2. 4  項目的測定

2. 4. 1 發(fā)酵飼料的感官評定

發(fā)酵5 d 后，隨機抽取9 個發(fā)酵飼料桶的飼料進行感官評定。

2. 4. 2  飼料中常規(guī)養(yǎng)分測定

未發(fā)酵、發(fā)酵3 d、發(fā)酵5 d 和發(fā)酵7 d 的飼料常規(guī)養(yǎng)分。粗灰分按《飼料中粗灰分的測定》( GB /T 6438—2007) 灼燒法測定; 干物質(zhì)按《食品安全國家標準食品中水分的測定》烘干稱重法( GB 5009. 3—2016) 測定; 粗脂肪按《糧油檢驗糧食中粗脂肪含量的測定》( GB /T5512—2008) 索氏提取法測定; 粗蛋白按《食品安全國家標準食品中蛋白質(zhì)的測定》( GB 5009. 5—2010) 凱氏定氮法測定; 鈣按《食品安全國家標準食品中鈣的測定》( GB 5009. 92—2016) 重量法測定;磷按( GB /T 216—2003) 鉬酸銨分光光度法測定。

2. 4. 3  生長性能

經(jīng)1 周適應(yīng)性飼養(yǎng)后，112 日齡時稱重作為初體重，161 日齡稱重作為末體重，試驗期共49 d，試驗結(jié)束后計算平均日采食量( g) 、日增重( g) 、料重比和成活率。平均日采食量= 總喂料量/( 雞只數(shù)量×飼養(yǎng)天數(shù)) ; 日增重= 總增重/( 雞只數(shù)量×飼養(yǎng)天數(shù)) ; 料重比= 總喂料量/總增重; 成活率=成活只數(shù)/總只數(shù)×100%。

2. 4. 4 屠宰性能和肉品質(zhì)

飼養(yǎng)試驗結(jié)束后，從對照組及試驗組各隨機選取10 只雞進行屠宰。測定其屠宰率、半凈膛率、全凈膛率、胸肌率、翅膀率、腿比率、腿肌率、腹脂率; 選取胸肌部位采用剪切法測定雞肉嫩度，使用pH 計測定pH 值，用EZ－滴水損失法測定滴水損失率。雞肉水分測定采用烘干法、粗蛋白測定采用凱氏定氮法、粗脂肪測定采用索氏提取法、粗灰分測定采用灼燒法、膽固醇和三酰甘油用試劑盒進行測定。屠宰率= 屠體重/宰前體重×100%; 半凈膛率= 半凈膛重/活重×100%; 全凈膛率= 全凈膛重/活重×100%; 胸肌率= 胸肌重/全凈膛重× 100%; 翅膀率= 兩側(cè)翅膀重/全凈膛重×100%; 腿比率= 兩側(cè)腿重/全凈膛重× 100%; 腿肌率= 腿肌重/全凈膛重×100%; 腹脂率= ( 腹脂重+ 肌胃外脂肪重) /全凈膛重×100%。

2. 4. 5  肉質(zhì)外觀與品嘗評分

人為評定，聘請10位不同階層人士對白切雞外觀及肉質(zhì)進行評分。外觀評分指標: 白切雞外觀，顏色( 黃、深黃、白色) ，體表肥度，毛孔大小等。肉質(zhì)評分指標: 肌肉細膩、潤滑、多汁、香甜程度等。

2. 5 數(shù)據(jù)的統(tǒng)計分析

用SPSS 20. 0 軟件進行分析，采用Duncan’s 法進行多重比較，顯著水平P＜0. 05，數(shù)據(jù)以“平均值±標準差”表示。

3  結(jié)果與分析

3. 1  發(fā)酵飼料的感官評定結(jié)果

從表2 可以看出，發(fā)酵5 d 的飼料質(zhì)地松軟，香味濃郁，顏色呈黃色，無霉斑，發(fā)酵效果較好。

3. 2  發(fā)酵飼料常規(guī)養(yǎng)分的測定結(jié)果

從表3 可以看出，不同發(fā)酵時間飼料中的粗蛋白含量均高于未發(fā)酵飼料，粗脂肪含量隨著發(fā)酵時間的延長呈上升趨勢，但差異不顯著( P＞0. 05) ; 粗灰分、鈣及總磷含量低于未發(fā)酵飼料，差異顯著( P＜0. 05) 。飼料最優(yōu)發(fā)酵時間為5 d 左右。

3. 3  發(fā)酵飼料對育肥期文昌雞生長性能的影響結(jié)果

從表4 可以看出，試驗組的采食量、料重比均低于對照組，而日增重及成活率均高于對照組，但差異不顯著( P＞0. 05) 。說明育肥期飼喂發(fā)酵飼料具有提高文昌雞生長性能和降低飼養(yǎng)成本的良好趨勢。

3. 4  發(fā)酵飼料對育肥期文昌雞屠宰性能和肉品質(zhì)的影響

3. 4. 1  發(fā)酵飼料對育肥期文昌雞屠宰性能的影響結(jié)果

從表5 可以看出: 試驗組屠宰率、半凈膛率、全凈膛率、胸肌率、翅膀率、腿比率及腿肌率與對照組相比均差異不顯著( P＞0. 05) ，其中半凈膛率、全凈膛率和胸肌率高于對照組，屠宰率、翅膀率、腿比率和腿肌率低于對照組; 試驗組腹脂率顯著低于對照組( P＜0. 05) ，表明飼喂發(fā)酵飼料可改善文昌雞的屠宰性能。

3. 4. 2   發(fā)酵飼料對文昌雞肉品質(zhì)的影響結(jié)果

從表6 可以看出: 試驗組pH 值較低，達到5. 46，顯著低于對照組( P＜0. 05) ; 而試驗組24 h 滴水損失顯著高于對照組( P＜0. 05) ，說明試驗組雞肉的保水性能較對照組差，但也在允許范圍內(nèi)，這可能與其肌肉多汁，pH 值較低的生理特性有關(guān)。

3. 4. 3   發(fā)酵飼料對文昌雞雞肉營養(yǎng)成分的影響結(jié)果

從表7 可以看出: 試驗組雞肉中的水分含量高于對照組，但差異不顯著( P＞0. 05) ; 粗蛋白、粗脂肪及粗灰分含量均比對照組低，但差異不顯著( P＞0. 05) ;膽固醇與三酰甘油含量也差異不大( P＞0. 05) 。說明育肥期飼喂發(fā)酵飼料對文昌雞雞肉營養(yǎng)成分無不良影響。

4. 4 文昌雞外觀與肉質(zhì)評分結(jié)果

從表8 可以看出，試驗組與對照組雞體外觀評分、肉質(zhì)品嘗評分結(jié)果均高于90 分，屬于優(yōu)等，但試驗組評分高于對照組，經(jīng)計算分別高1. 1，2. 9 個百分點，兩組間差異顯著(P＜0. 05) 。對照組白切雞外觀顏色都呈淡黃色，皮膚光滑，豐滿度好。通過品嘗，口感上能辨別出對照組與試驗組雞肉肉質(zhì)的差別，試驗組的雞肉更多汁、滋味更醇厚。

4    討   論

4. 1   發(fā)酵飼料菌種篩選與發(fā)酵工藝對飼料發(fā)酵效果的影響

發(fā)酵飼料中鈣、磷含量低于未發(fā)酵飼料，可能是微生物在發(fā)酵的過程中攝取發(fā)酵全價料中營養(yǎng)物質(zhì)，維持自身的生長發(fā)育，從而造成鈣磷含量的降低。發(fā)酵飼料中的粗蛋白含量均高于未發(fā)酵飼料，是微生物發(fā)酵起了一定作用。這說明發(fā)酵可以提高其全價配合飼料的營養(yǎng)成分，與余冰等研究結(jié)果一致。

4. 2   發(fā)酵飼料對育肥期文昌雞生長性能的影響

試驗組的采食量、料重比、死亡數(shù)均低于對照組，而日增重及成活率均高于對照組。張書杰等在使用發(fā)酵秸稈飼喂牛羊中也發(fā)現(xiàn)，使用發(fā)酵秸稈可以有效地提高牛羊的增重，說明發(fā)酵提高了飼料的利用效率并促進了飼料的消化和吸收，進而提高了經(jīng)濟效益。

4. 3   發(fā)酵飼料對育肥期文昌雞屠宰性能的影響

屠宰性能是衡量家禽肉用性能的一項重要指標，其中屠宰率和全凈膛率是衡量屠宰性能的兩個重要指標，一般認為屠宰率在80%以上、全凈膛率在60%以上，其肉用性能良好。本試驗結(jié)果表明兩組雞產(chǎn)肉性能良好。

4. 4   發(fā)酵飼料對育肥期文昌雞肉品質(zhì)的影響

對于文昌雞來說，需要有一定的脂肪沉積，一定的脂肪沉積可以增加口感、提升肉質(zhì)。雞肉中的脂肪含量影響著肉品的多汁性和風味，合理的脂肪含量會讓其肉質(zhì)鮮嫩而多汁，口感好。本試驗中試驗組的粗脂肪含量高于對照組，而腹脂率顯著低于對照組，說明試驗組脂肪的分布可能更合理，品嘗試驗中也證明了試驗組的雞肉更多汁、滋味更醇厚。 

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