枯草芽孢桿菌對(duì) AA 肉仔雞血清抗氧化功能和肉品質(zhì)的影響
摘要：為研究枯草芽孢桿菌對(duì) AA 肉仔雞抗氧化功能和肉品質(zhì)的影響，試驗(yàn)選取1日齡 AA 肉仔雞 300 只，隨機(jī)分為 5 組，分別為空白對(duì)照組（基礎(chǔ)日糧）、抗生素對(duì)照組（基礎(chǔ)日糧中添加林可霉素4mg/kg）、試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組（分別在基礎(chǔ)日糧中添加枯草芽孢桿菌菌粉0.02%、0.06%、0.10%）。結(jié)果表明：AA 肉仔雞日糧中添加0.10%枯草芽孢桿菌菌粉能極顯著提高血清谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）活性（P＜0.01），顯著提高血清總抗氧化能力（T-AOC）和總超氧化物歧化酶（T-SOD）活性（P＜0.05）；枯草芽孢桿菌菌粉0.06%、0.10%可顯著提高肉雞屠宰率（P＜0.05），但對(duì)胸肌率、腿肌率和腹脂率無顯著影響（P＞0.05）；0.06%、0.10%枯草芽孢桿菌菌粉可極顯著提高胸肌亮度值（Ｌ*）、紅度值（ａ*）和黃度值（ｂ*）（P＜0.01），但對(duì)pH值、剪切力、滴水損失影響均不顯著（P＞ 0.05）。研究表明，枯草芽孢桿菌具有改善肉雞抗氧化功能和肉品質(zhì)的作用，且以添加量為0.1%效果較佳。
近年來，尋找高效、綠色、無殘留、能替代抗生素的飼料添加劑成為畜牧行業(yè)關(guān)注的重點(diǎn)。枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis）是當(dāng)前使用較為廣泛的益生菌類飼料添加劑，具有調(diào)節(jié)腸道微生態(tài)平衡、提高養(yǎng)分利用率、促進(jìn)動(dòng)物生長發(fā)育、改善機(jī)體免疫力等多種功效。枯草芽孢桿菌不僅耐高溫、耐高壓、耐酸堿，還具有穩(wěn)定性高的特點(diǎn)。無論是在顆粒飼料中還是粉狀飼料中，枯草芽孢桿菌都能順利進(jìn)入腸道，抑制有害菌增殖，改善腸道內(nèi)環(huán)境。但當(dāng)前的研究多集中在枯草芽孢桿菌對(duì)畜禽生長性能和免疫功能的影響上，枯草芽孢桿菌對(duì)肉品質(zhì)影響的研究并不多見。本試驗(yàn)以 AA 肉仔雞為研究對(duì)象，探討枯草芽孢桿菌對(duì)其肉品質(zhì)和抗氧化功能的影響，旨在為生產(chǎn)實(shí)踐提供參考。
1 材料與方法
1.1 試驗(yàn)材料
枯草芽孢桿菌（粉末狀，活菌數(shù)為1×109CFU/g）
1.2 試驗(yàn)動(dòng)物
1日齡 AA 肉仔雞 300 只，購自山東益生種畜禽股份有限公司。
1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)
將 300 只 1 日齡 AA 肉仔雞隨機(jī)分為 5 組，每組 3 個(gè)重復(fù)， 每個(gè)重復(fù) 20 只（公、母各半）。空白對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧，抗生素對(duì)照組在基礎(chǔ)日糧中添加林可霉素4mg/kg，試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組分別在在基礎(chǔ)日糧中添加枯草芽孢桿菌菌粉0.02%、0.06%、0.10%。
1.4 試驗(yàn)日糧
基礎(chǔ)日糧參照美國NRC（1994）肉雞營養(yǎng)需要配制。基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。
1.5 飼養(yǎng)管理
試驗(yàn)雞舍在試驗(yàn)開始前 1 周按常規(guī)消毒程序進(jìn)行消毒，試驗(yàn)中每日清掃雞舍，每周對(duì)雞舍進(jìn)行帶雞消毒。試驗(yàn)雞采用3層籠養(yǎng)，自然光照輔以人工照明，自由采食和飲水。按照常規(guī)免疫程序?qū)υ囼?yàn)用雞進(jìn)行新城疫免疫。
1.6 測定指標(biāo)
1.6.1 抗氧化功能測定
試驗(yàn)第28、42d，每個(gè)重復(fù)選取 3 只雞進(jìn)行翅靜脈采血（采血前空腹12h）5mL，靜置30min，3000r/min離心15min，取上清液1～1.5mL置于離心管中，-20℃保存，備用。血清抗氧化功能測定指標(biāo)包括：丙二醛（MDA）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）、總超氧化物歧化酶（T-SOD）和總抗氧化能力（T-AOC）。試驗(yàn)所用試劑盒為南京建成生物工程研究所生產(chǎn)。
1.6.2 肉品質(zhì)測定
試驗(yàn)第42d，每個(gè)重復(fù)選取2只雞屠宰，分離內(nèi)臟器官，測定屠宰重，完整分離胸肌、腿肌和腹脂，稱重。計(jì)算胸肌率、腿肌率、腹脂率。分別取胸肌和腿肌測定肌肉的pH值、肉色、剪切力和滴水損失。pH值：于屠宰后24h用pH計(jì)（HI8424型，北京 Hanna 儀器科學(xué)技術(shù)有限公司）測定胸肌pH值。肉色：于屠宰后24h用色差儀（CR-410型，日本美能達(dá)公司）測定胸肌亮度值（Ｌ*）、紅度值（ａ*）和黃度值（ｂ*）。剪切力：取胸肌約3cm×5cm，用嫩度儀（Instron 4411型，美國英斯特朗公司）測定肌肉剪切力。滴水損失：取胸肌約5g，懸吊在吹氣袋中，4℃懸掛24h后稱重，計(jì)算滴水損失。
滴水損失（%）=（滴水前重量―滴水后重量）/滴水后重量×100（1）
1.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析
試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用 SPSS 20.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析，結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。
2 結(jié)果與分析
2.1 枯草芽孢桿菌對(duì) AA 肉仔雞血清抗氧化功能的影響
由表2可知，試驗(yàn) 28d，試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組丙二醛含量和空白對(duì)照組以及抗生素對(duì)照組相比差異不顯著（P＞0.05）；試驗(yàn)Ⅲ組谷胱甘肽過氧化物酶活性極顯著高于空白對(duì)照組和抗生素對(duì)照組（P＜0.01），試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ組谷胱甘肽過氧化物酶活性顯著高于空白對(duì)照組和抗生素對(duì)照組（P＜0.05）；試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組總超氧化物歧化酶活性顯著高于空白對(duì)照組和抗生素對(duì)照組（P＜0.05）；試驗(yàn)Ⅱ、Ⅲ組總抗氧化能力顯著高于空白對(duì)照組和抗生素對(duì)照組（P＜0.05）。試驗(yàn)42d，試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組丙二醛含量和空白對(duì)照組以及抗生素對(duì)照組相比差異不顯著（P＞0.05）；試驗(yàn)Ⅲ組谷胱甘肽過氧化物酶活性極顯著高于空白對(duì)照組和抗生素對(duì)照組（P＜0.01），試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ組谷胱甘肽過氧化物酶活性顯著高于空白對(duì)照組和抗生素對(duì)照組（P＜0.05）；試驗(yàn)Ⅲ組總超氧化物歧化酶活性顯著高于空白對(duì)照組和抗生素對(duì)照組（P＜0.05）；試驗(yàn)Ⅱ、Ⅲ組總抗氧化能力顯著高于空白對(duì)照組和抗生素對(duì)照組（P＜0.05）。
2.2 枯草芽孢桿菌對(duì) AA 肉仔雞屠宰性能的影響（見表 3）
2.3 枯草芽孢桿菌對(duì) AA 肉仔雞肉品質(zhì)的影響
由表4可知，試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組pH值、剪切力、滴水損失與空白對(duì)照組和抗生素對(duì)照組差異均不顯著（P＞0.05），試驗(yàn)Ⅱ、Ⅲ組亮度值（Ｌ*）極顯著高于空白對(duì)照組和抗生素對(duì)照組（P＜0.01），試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組紅度值（ａ*）和黃度值（ｂ*）極顯著高于空白對(duì)照組和抗生素對(duì)照組（P＜0.01）。
2.3 枯草芽孢桿菌對(duì) AA 肉仔雞肉品質(zhì)的影響
由表4可知，試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組pH值、剪切力、滴水損失與空白對(duì)照組和抗生素對(duì)照組差異均不顯著（P＞0.05），試驗(yàn)Ⅱ、Ⅲ組亮度值（Ｌ*）極顯著高于空白對(duì)照組和抗生素對(duì)照組（P＜0.01），試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組紅度值（ａ*）和黃度值（ｂ*）極顯著高于空白對(duì)照組和抗生素對(duì)照組（P＜0.01）。
2.4 枯草芽孢桿菌對(duì) AA 肉仔雞抗氧化功能的影響
谷胱甘肽過氧化物酶、超氧化物歧化酶和總抗氧化能力是反映機(jī)體抗氧化功能的重要指標(biāo)。其中，谷胱甘肽過氧化物酶和超氧化物歧化酶能阻止自由基的生成和脂質(zhì)過氧化，而丙二醛含量則反映了機(jī)體氧化受損的程度。翟玲等研究表明，在振寧雛公雞基礎(chǔ)日糧中添加枯草芽孢桿菌制劑0.75g/kg（活菌數(shù)為108CFU/g）能顯著提高血清總抗氧化能力、谷胱甘肽過氧化物酶和超氧化物歧化酶活性（P＜0.05），而丙二醛含量雖然有所降低，但差異不顯著（P＞0.05）。彭豫東等研究表明，300mg/kg枯草芽孢桿菌能顯著提高14d石門土雞的血清總超氧化物歧化酶活性（P＜0.05），300、600mg/kg枯草芽孢桿菌能極顯著提高14和28d石門土雞的血清谷胱甘肽過氧化物酶活性（P＜0.01）。本試驗(yàn)結(jié)果表明，AA肉仔雞日糧中添加0.02%、0.06%、0.10%枯草芽孢桿菌菌粉對(duì)丙二醛（MDA）含量影響不顯著（P＞0.05），添加0.10%枯草芽孢桿菌菌粉能極顯著提高血清谷胱甘肽過氧化物酶活性（P＜0.01），而添加0.02%、0.06%枯草芽孢桿菌菌粉也能顯著提高血清谷胱甘肽過氧化物酶活性（P＜0.05），添加0.10%枯草芽孢桿菌菌粉能顯著提高血清總超氧化物歧化酶活性（P＜0.05），添加0.06%、0.10%枯草芽孢桿菌菌粉能顯著提高血清總抗氧化能力（P＜0.05），與前人研究結(jié)果基本一致。由此可見，枯草芽孢桿菌菌粉能夠提高血清抗氧化酶活性，降低自由基含量，具有改善肉雞抗氧化功能的作用。
2.5 枯草芽孢桿菌對(duì) AA 肉仔雞屠宰性能的影響
胸肌率、腿肌率和腹脂率是反映肉雞肉用性能的重要指標(biāo)。潘康成等研究表明，基礎(chǔ)日糧中添加0.1%枯草芽孢桿菌制劑能顯著提高肉雞的腿肌重和腿肌率（P＜0.05），但對(duì)屠體重、屠宰率、腔膛重、腔膛率、胸肌重、胸肌率、腹脂重、腹脂率、熟肉率等均無顯著影響（P＜0.05）。本試驗(yàn)結(jié)果表明，AA 肉仔雞日糧中添加0.06%、0.10%枯草芽孢桿菌菌粉可顯著提高肉雞屠宰率（P＜0.05），但對(duì)胸肌率、腿肌率和腹脂率無顯著影響（P＞0.05）。造成結(jié)果差異的原因可能是肉雞品種或菌種的含量和添加劑量不同，具體原因還有待進(jìn)一步探究。
2.6 枯草芽孢桿菌對(duì) AA 肉仔雞肉品質(zhì)的影響
肌肉pH值反映宰后一定時(shí)間內(nèi)肌肉的酸堿度。肉色主要包括亮度值（Ｌ*）、紅度值（ａ*）和黃度值（ｂ*）3個(gè)指標(biāo)。亮度值（Ｌ*）主要反映肌肉的潤澤度，紅度值（ａ*）主要反映肌肉內(nèi)肌紅蛋白的數(shù)量，與黃度值（ｂ*）一起反映肌肉顏色的深淺。剪切力是評(píng)定肌肉嫩度的指標(biāo)，剪切力越小，肉質(zhì)越嫩。滴水損失反映肌肉在一定時(shí)間內(nèi)保持其內(nèi)含水的能力。李衛(wèi)芬等研究表明，基礎(chǔ)日糧中添加枯草芽孢桿菌 105CFU/g能顯著降低羅斯308肉雞失水率（P＜0.05），能提高胸肌和腿肌的亮度值（Ｌ*）、紅度值（ａ*）和黃度值（ｂ*），但差異不顯著（P＞0.05）。本試驗(yàn)研究結(jié)果表明，AA肉仔雞日糧中添加0.06%、0.10%枯草芽孢桿菌菌粉可極顯著提高胸肌亮度值（Ｌ*）（P＜0.01），0.02%、0.06%、0.10%枯草芽孢桿菌菌粉可極顯著提高胸肌紅度值（a*）和黃度值（ｂ*）（P＜0.01），但對(duì)pH值、剪切力、滴水損失影響均不顯著（P＞0.05），與前人研究結(jié)果基本一致。由此可見，枯草芽孢桿菌菌粉能夠改善肉色，從而提高肉雞的肉品質(zhì)。
3 結(jié)論
本試驗(yàn)結(jié)果表明，AA 肉仔雞日糧中添加枯草芽孢桿菌具有改善肉雞抗氧化功能，改善肉品質(zhì)的作用，且以添加量為 0.1% 效果最佳。
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