發(fā)酵構樹葉對三黃雞代謝性能的影響
1 材料與方法
1.1 材 料
構樹葉:野外采集,曬干后粉碎。
纖維素酶(3000 IU/g)由湖南某生化有限公司生產(chǎn),主要成分是中性纖維素酶。
蛋白酶(6000 IU/g)由某物制品有限公司生產(chǎn),主要成分是木瓜蛋白酶。
復合酶由河北滄州某獸藥有限公司生產(chǎn),主要成分是纖維素酶、蛋白酶、木聚糖酶、木質(zhì)素酶和半纖維素酶等。
EM 原露由江西某生物技術有限公司生產(chǎn),主要菌群是光合細菌、真菌和放線菌等。
三黃雞120日齡,平均體質(zhì)量約1.2kg。
1.2 方 法
1.2.1 發(fā)酵構樹葉的制備
稱取200g 構樹葉12份,分4個試驗組,每組3個重復。分別添加0.1% 蛋白酶、0.1% 纖維素酶、0. 2% 復合酶和0.2%EM 菌種,并加入約60% 的水將構樹葉混勻,然后壓實且真空密封貯存在2000mL廣口瓶中,將發(fā)酵物置于37 ℃恒溫箱中發(fā)酵6d。發(fā)酵后用常規(guī)方法處理和保存樣品,并按照董寬虎的《飼草生產(chǎn)學》進行感官鑒定。
1.2.2 構樹葉營養(yǎng)成分的測定
水分、粗蛋白、粗灰分、粗纖維、粗脂肪、鈣和磷等按常規(guī)分析方法測定,每次測定重復3次,測定誤差參照《飼料分析及飼料質(zhì)量檢測技術》介紹的方法進行。
1.2.3 代謝試驗
選取120 日齡健康的24只三黃雞,隨機分6組,每組4 個重復。1 組為對照組,2 組添加5 %的構樹葉粉,3 組添加5% 復合酶發(fā)酵的構樹葉粉,4 組添加5% 的蛋白酶發(fā)酵的構樹葉粉,5 組添加5% 的EM 原露發(fā)酵的構樹葉粉,6 組添加5% 的纖維素酶發(fā)酵的構樹葉粉。
1.3 統(tǒng)計方法
采用SPSS(13.0)軟件進行統(tǒng)計分析,統(tǒng)計軟件中的一般線性模型(GLM)進行單因素方差分析,以LSD 法進行平均數(shù)的多重分析,顯著性水平定為P < 0.05。
2 結(jié)果與分析
2.1 發(fā)酵處理對構樹葉營養(yǎng)成分的影響
經(jīng)發(fā)酵6d 后的構樹葉,外觀色澤黃綠,濕度適中,酒曲香味較濃,質(zhì)地柔軟松散。分析其營養(yǎng)成分發(fā)現(xiàn),經(jīng)發(fā)酵處理后的構樹葉粗灰分、粗脂肪、粗蛋白和游離氨基酸含量均比對照組高,粗纖維含量則有不同程度的下降。
從表2 可見:經(jīng)發(fā)酵處理的構樹葉粗灰分含量均有所增加,并顯著高于對照組,不同處理間差異不顯著;發(fā)酵處理的構樹葉粗脂肪含量增加,除了纖維素酶發(fā)酵組,其余各組均顯著高于對照組;經(jīng)發(fā)酵處理的構樹葉粗纖維含量均有不同程度的下降,但與對照組相比,差異不顯著;其中,纖維素酶發(fā)酵的構樹葉粗纖維含量比對照組下降10.8%,發(fā)酵處理的構樹葉粗蛋白含量均顯著增加,且顯著高于對照組,用EM 發(fā)酵的構樹葉粗蛋白含量最高,比對照組相比提高13.6% ;游離氨基酸含量以蛋白酶發(fā)酵的試驗組最高,極顯著高于對照組,提高95.4 %,用纖維素酶和復合酶發(fā)酵的試驗組亦顯著高于構樹原葉,而用EM 發(fā)酵的試驗組與對照組相比,差異不顯著。
2.2 發(fā)酵構樹葉營養(yǎng)成分表觀消化率的比較
從表3 可見:三黃雞對各日糧的營養(yǎng)成分消化利用率無差異。粗蛋白、粗纖維、粗脂肪和磷的表觀消化率X-LBP-基礎日糧高于對照組和其他試驗組(P >0.05),鈣的表觀消化率略低于基礎日糧組,但高于其他試驗組(P >0.05)。靈山雞對纖維素酶發(fā)酵的構樹葉消化利用率較好。EM、復合酶或蛋白酶發(fā)酵處理亦能改善靈山雞對構樹葉營養(yǎng)物質(zhì)的消化利用。
3 討 論
3.1 不同發(fā)酵處理對構樹葉營養(yǎng)成分的影響
構樹葉是較好的蛋白質(zhì)飼料,但其蛋白質(zhì)結(jié)構復雜,利用率不高,尤其是家禽和單胃動物的消化道難降解,如何能有效利用構樹葉資源并將其開發(fā)成新一代植物性蛋白飼料是當前急需解決的問題之一。構樹葉發(fā)酵處理主要是為了改變粗纖維、粗蛋白和游離氨基酸含量。試驗表明:發(fā)酵處理可部分降解構樹葉粗蛋白,增加粗蛋白和游離氨基酸含量,可提高構樹的利用價值。
經(jīng)纖維素酶發(fā)酵的構樹葉,粗纖維含量最低,復合酶次之,蛋白酶處理則對粗纖維降解作用不大。復合酶、EM 原露和蛋白酶的發(fā)酵效果不如纖維素酶,可能與酶制劑的種類和活性有關。復合酶制劑通常比單一酶制劑效果好,但并不意味著復合酶制劑中酶的種類愈多愈好。一般情況下,添加以內(nèi)源性消化酶為主的復合酶作用不明顯,添加以外源性酶為主的復合酶更有實際意義(鄧君明,2003)。
構樹葉的蛋白結(jié)構復雜,經(jīng)發(fā)酵作用,游離氨基酸含量極顯著增加,尤以蛋白酶的作用最明顯。推測木瓜蛋白酶是一種含巰基(- SH)肽鏈內(nèi)切酶,具有蛋白酶和酯酶的活性,對動植物蛋白、多肽或蛋白質(zhì)有較強的水解能力,能產(chǎn)生更多的多肽或游離氨基酸(乙引,2000);EM 原露是由多種微生物組成,發(fā)酵構樹葉時,這些微生物可大量繁殖,不但菌體蛋白含量增加,還能分泌多種酶,從而有效提高發(fā)酵構樹葉中的粗蛋白含量。
3.2 發(fā)酵構樹葉蛋白和纖維的表觀消化率
構樹葉利用率與粗纖維含量及蛋白質(zhì)結(jié)構有關。粗纖維含量高不僅影響自身的消化,對其他營養(yǎng)成分的消化吸收也有不利影響,表現(xiàn)出抗營養(yǎng)作用;構樹葉蛋白結(jié)構復雜直接影響腸道吸收,導致單胃動物及家禽對營養(yǎng)物質(zhì)的利用率降低。
單胃動物和家禽內(nèi)源性纖維素酶不足或缺乏,則可降低纖維素消化利用率、添加纖維素酶可補充內(nèi)源酶的不足,提高動物對粗纖維的利用率。同時還可改善消化道酶系組成、酶量及活性,促進小腸對營養(yǎng)物質(zhì)及與細胞壁結(jié)合的礦物質(zhì)的吸收。呂東海(2002)研究證實,家禽腸道微生物分解產(chǎn)生的可溶性非淀粉多糖能增加腸道食糜的黏度,導致食糜在消化道的滯留時間延長,進一步促進腸道后段微生物發(fā)酵,從而提高粗纖維的消化率。崔琰(2008)指出,纖維素及發(fā)酵產(chǎn)物的共同作用能刺激腸道蠕動,促進營養(yǎng)物質(zhì)的消化和吸收。從試驗結(jié)果看,經(jīng)纖維素酶發(fā)酵的構樹葉,纖維素和蛋白質(zhì)的表觀消化率最高,EM處理組次之,說明構樹葉細胞壁可在纖維素酶或復合微生物作用下部分降解,從而促進腸道對非淀粉多糖的消化吸收,提高粗纖維的利用率;與此同時,構樹葉細胞壁部分裂解后,有利于改善腸道消化酶對蛋白質(zhì)的分解作用,增加游離氨基酸含量,提高蛋白質(zhì)的表觀消化率。
木瓜蛋白酶發(fā)酵雖然能增加構樹葉游離氨基酸含量,但作為一種巰基蛋白酶,其對大豆蛋白以外的植物蛋白水解能力較差(陳曉春,2005),加上未經(jīng)過裂解細胞壁的屏障作用,單一木瓜蛋白酶發(fā)酵的構樹葉的蛋白質(zhì)表觀消化率明顯低于纖維素酶組和EM 處理組;另外,由于構樹葉本身的粗纖維含量較高,蛋白酶并不能降低日糧粗纖維含量,粗纖維的抗營養(yǎng)作用也可使粗蛋白表觀消化率下降。
與基礎日糧組相比,添加5%構樹葉的LBP組粗蛋白、粗纖維、粗脂肪和干物質(zhì)的表觀消化率均有一定程度的不良影響。發(fā)酵處理能有效提高靈山雞對構樹葉營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收。
3.3 構樹葉的應用前景
我國飼料資源尤其是蛋白質(zhì)飼料短缺的矛盾較為突出。構樹適應性廣且抗逆性強,構樹葉粗蛋白含量超過20%,作為一種非常規(guī)蛋白質(zhì)飼料資源有著良好的開發(fā)應用前景。
相關鏈接;99多功能飼料發(fā)酵劑——高濃度乳酸菌為主的固態(tài)飼料發(fā)酵劑,更輕易成功、效果更好的生物飼料發(fā)酵劑,簡單好用的中草藥發(fā)酵劑
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